Alfredo Bernardini wurde 1961 in Rom geboren und zog 1981 in die Niederlande, um sich auf Barockoboe und Alte Musik zu spezialisieren, u. a. bei Bruce Haynes und Ku Ebbinge. 1987 erhielt er sein Solistendiplom am Königlichen Konservatorium in Den Haag.
Bernardini konzertierte in ganz Europa, in Russland, den USA, Kanada, Japan, China, Korea, Malaysia, Ägypten, Israel, Südamerika und Australien als Mitglied renommierter Barockensembles wie Hesperion XX, Le Concert des Nations, La Petite Bande, Amsterdam Baroque Orchestra, Freiburger Barockorchester, The English Concert, Bach Collegium Japan, Balthasar-Neumann-Ensemble und hat an mehr als 100 Aufnahmen mitgewirkt.
Im Jahr 1989 gründete er zusammen mit den Brüdern Paolo und Alberto Grazzi das Ensemble Zefiro. Seine Aufnahmen mit Zefiro wurden mit wichtigen Preisen wie dem Cannes Classical Award und dem Diapason d’Or de l’Année 2009 ausgezeichnet. Als Dirigent hat er mit Orchestern in Italien, Frankreich, Deutschland, Spanien, Portugal, Belgien, Holland, Dänemark, Norwegen, Polen, Großbritannien, Schweden, Kanada, Australien, Israel und mit dem European Union Baroque Orchestra zusammengearbeitet. Seine Forschungen über die Geschichte der Holzblasinstrumente haben zu mehreren Artikeln geführt, die in wichtigen internationalen Zeitschriften veröffentlicht wurden. Seit 1992 unterrichtet er Barockoboe am Konservatorium von Amsterdam und lehrte von 2002 bis 2009 an der Escola Superior de Musica de Cataluña in Barcelona. Außerdem war er Gastlehrer an Musikakademien und bei Sommerkursen in Italien, Frankreich, Spanien, Portugal, Deutschland, Österreich, Dänemark, Israel und den USA.